名稱JM(人T淋巴細胞白血病細胞)(STR鑒定正確)


　　背景描述T-cell line derived from the peripheral blood of a 14-year old male with T-cell is isolated from the same patient as Jurkat。JM has the ability to grow HIV.


　　種屬人


　　年齡（性別）男；14歲


　　組織來源外周血


　　生長特性懸浮細胞


　　細胞形態淋巴細胞樣


　　細胞類型腫瘤細胞


　　腫瘤類型白血病細胞


　　生物安全等級1


　　生長培養基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S


　　推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL


　　推薦換液頻率2~3次/周


　　倍增時間~ hours


　　凍存條件


　　凍存液：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO


　　溫度：液氮


　　培養條件


　　氣相：空氣，95%；CO2，5%


　　溫度：37℃


　　注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養液。


　　細胞培養步驟：


　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。


　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。


　　1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：


　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。


　　2.加1-2ml消化液（ %Trypsin- ）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養基終止消化。