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微生物染色的注意事項(xiàng)：

1、 待檢菌菌齡應(yīng)為18-24小時(shí)。一般情況下，革蘭氏陰性菌的染色反應(yīng)較為穩(wěn)定，不易受菌齡的長(zhǎng)短影響；而革蘭氏陽(yáng)性菌，有的在幼齡時(shí)呈陽(yáng)性，超過(guò)24小時(shí)可變?yōu)殛幮浴９逝囵B(yǎng)物越陳舊，菌細(xì)胞衰老、死亡，則染色常為陰性，造成錯(cuò)判。

2、 涂片以勻薄為佳，切不可濃厚。過(guò)于密集的菌體，因洗脫不勻常呈假陽(yáng)性。鏡檢革蘭氏染色反應(yīng)時(shí)，要以分散開(kāi)的細(xì)菌著色為準(zhǔn)。涂片后不宜用火焰烤干，宜自然干燥；若經(jīng)火焰固定時(shí)，應(yīng)以不燙手為度，以免菌體受損，致使染色反應(yīng)不準(zhǔn)。

3、 革蘭染色操作的關(guān)鍵步驟是對(duì)脫色的掌握，脫色時(shí)間不足，革蘭氏陰性菌可染成陽(yáng)性結(jié)果；脫色過(guò)度，革蘭氏陽(yáng)性菌會(huì)染成陰性結(jié)果。故應(yīng)注意掌握，以無(wú)紫色脫出時(shí)立即水洗。脫色時(shí)間應(yīng)根據(jù)涂沫厚薄、涂片含水量多少適當(dāng)掌握，涂沫厚、涂片含水少（水洗后瀝干水分）時(shí)，脫色時(shí)間稍長(zhǎng)；涂沫薄、涂片含水量多（未瀝干）時(shí)，脫色時(shí)間稍短，在20-30秒內(nèi)調(diào)整。

4、 碘液配制后，應(yīng)裝在密閉的暗色瓶?jī)?nèi)儲(chǔ)存。如因儲(chǔ)存不當(dāng)，部分碘將被揮發(fā)或被還原，碘液由原來(lái)的紅棕色變?yōu)榈S色，以至影響固定結(jié)晶紫的作用，故不宜再用。

5、 革蘭氏染色能否獲得滿(mǎn)意的結(jié)果，與操作者的經(jīng)驗(yàn)有很大關(guān)系。操作沒(méi)有把握或?qū)θ疽河袘岩蓵r(shí)，應(yīng)以對(duì)照菌同時(shí)染色。

微生物培養(yǎng)，是指借助人工配制的培養(yǎng)基和人為創(chuàng)造的培養(yǎng)條件（如培養(yǎng)溫度等），使某些（種）微生物快速生長(zhǎng)繁殖。微生物培養(yǎng)可分為純培養(yǎng)和混合培養(yǎng)，前者是指對(duì)已純化的單一菌種進(jìn)行培養(yǎng)和利用；后者是指對(duì)混合菌種或自然樣品（如土壤）中的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)培養(yǎng)基上所生長(zhǎng)微生物的種類(lèi)和數(shù)量，可在程度上估算土壤中微生物的多樣性與數(shù)量。微生物培養(yǎng)需要用到培養(yǎng)基，根據(jù)微生物的不同種類(lèi)和生活習(xí)性來(lái)配制特定的培養(yǎng)基。微生物培養(yǎng)成功的關(guān)鍵在于無(wú)菌操作，如果培養(yǎng)器具和培養(yǎng)基不能滅菌、培養(yǎng)的過(guò)程中有雜菌污染是很容易失敗的。常用的微生物培養(yǎng)基可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基、運(yùn)送保存增菌培養(yǎng)基、生化試驗(yàn)培養(yǎng)基、藥物敏感試驗(yàn)培養(yǎng)基、細(xì)菌L型培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)基、支原體衣原體和螺旋體培養(yǎng)基、病毒培養(yǎng)基等多種培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基有LB培養(yǎng)基、SOB培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基、沙保羅瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、SM懸浮培養(yǎng)基、ADF培養(yǎng)基等。

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