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軟骨染色液（番紅O法，微生物是指包含細菌、真菌、病毒以及一些小型的寄生蟲等原生生物、顯微藻類等在內的一大類生物群體，它個體微小，與人類關系密切，涵蓋了有益或有害的眾多種類，廣泛涉及食品、醫藥、工農業、環保等諸多領域。微生物學實驗主要包含微生物染色與形態結構觀察、接種與培養、分離與純化、微生物生理生化反應、菌種保藏等。 微生物染色的基本原理，是借助物理因素或化學因素的作用而進行的。物理因素如細胞及細胞物質對染料的毛細現象、滲透、吸附作用等?；瘜W因素則是根據細胞物質和染料的不同性質而發生的各種化學反應。微生物染色方法一般分為單染色法和復染色法兩種。前者用一種染料使微生物染色，但不能鑒別微生物。復染色法是用兩種或兩種以上染料，有協助鑒別微生物的作用，故亦稱鑒別染色法。常用的復染色法有革蘭氏染色法和抗酸染色法，此外還有鑒別細胞各部分結構的（如芽胞、鞭毛、細胞核等）特殊染色法。 微生物的染色方法很多，各種方法應用的染料也不盡相同，但是一般染色都要通過涂片、干燥、固定、染色、脫色、復染、水洗、干燥、鏡檢等一系列程序。食品微生物檢驗中常用的是單染色法和革蘭氏染色法。 單染色法是用一種染色劑對涂片進行染色，簡便易行，適于進行微生物的形態觀察。在一般情況下，細菌菌體多帶負電荷，易于和帶正電荷的堿性染料結合而被染色。因此，常用堿性染料進行單染色，如美蘭(亞甲基藍)、孔雀綠、堿性復紅、結晶紫和中性紅等。若使用酸性染料，多用剛果紅、伊紅和酸性品紅等。使用酸性染料時，降低染液的PH值，使其呈現強酸性（低于細菌菌體等電點），讓菌體帶正電荷，才易于被酸性染料染色。 革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創立。

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